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產(chǎn)品型號：PC-500, 4X96
產(chǎn)品代碼：
產(chǎn)品價(jià)格：
折 扣 率： 0
最后更新：2017-06-12
關(guān) 注 度：3770
生產(chǎn)企業(yè)：深圳市國泰宜豐科技有限公司
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產(chǎn)品詳細(xì)介紹PSIΨClone PCR 96試劑盒
一種用于純化PCR反應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物的試劑盒,適用于真空或離心的流程
這種PSIΨClone PCR 96試劑盒以方便的96孔板的形式為研究者提供了一種快速地處理PCR反應(yīng)產(chǎn)物的方法。其流程可分為真空法和離心法。兩種流程都可以快速地獲得高產(chǎn)量、高純度適用于分子生物學(xué)研究的DNA。
PCR反應(yīng)中的DNA片斷（從100bp到10kb），可以與試劑盒中的板上的膜結(jié)合。然后洗去殘余的引物、核苷酸、酶和鹽類。隨后可以用低鹽緩沖液把DNA洗脫下來，DNA的濃度較高可不作任何處理直接應(yīng)用于進(jìn)一步的研究。
PCR擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物中殘余的引物、核苷酸、酶和鹽類會影響分子研究（如克隆、測序等）。PSIΨClone PCR 96試劑盒可以以方便的96孔板的形式有效地去除這些殘余的反應(yīng)物。這些純化的擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接用于測序或者亞克隆。
試劑盒的組分及其制備（參見后面的儲存條件）
PCR 96 板：可以直接使用。
結(jié)合緩沖液：這種溶液在低于22℃時(shí)會產(chǎn)生結(jié)晶。如果存在結(jié)晶，則將其加熱至50℃融解。
清洗緩沖液：所提供的清洗緩沖液是高濃度的，使用前需用乙醇將其稀釋至乙醇終濃度為75-80%。具體說明請參見介紹流程的章節(jié)。
洗脫緩沖液：可直接使用。
收集板：使用真空法時(shí)所提供的板特異地將孔之間的距離減到了最小（可以用其它的板來代替）。
PSI Clone PCR 96 DNA純化試劑盒所提供的試劑足以滿足對標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)進(jìn)行96次DNA分離的需要。
使用真空叉管處理PCR反應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物
清洗緩沖液的濃溶液 （Buffer ＃2） 使用之前用乙醇稀釋。 如果是使用PCR 96單板試劑盒（Cat# PC-500），在清洗緩沖液的濃溶液試劑瓶中加入48ml乙醇。如果是使用PCR 96 4板試劑盒（Cat# PC-501），則取出12ml清洗緩沖液濃溶液于一空的試劑瓶中，并且加入48ml乙醇。處理每個(gè)板之前重復(fù)這一步驟。
板上未使用的孔必須用帶子封住，以免在處理過程中真空泄漏。
操作流程：
1. 向PCR反應(yīng)物中加入1體積的結(jié)合緩沖液（＃1）并混合均勻。
2. 將廢棄的托盤放在真空叉管內(nèi)。
3. 將PCR反應(yīng)物和結(jié)合緩沖液的混合物加至平板上，開始抽真空直至所有樣品穿過膜層。
4. 吸取200ul稀釋的清洗緩沖液于每孔清洗板。抽真空直至所有的液體穿過膜。
5. 重復(fù)兩次清洗的步驟，總共洗三次。
6. 真空條件下使板空干10分鐘。
7. 把板從真空管套中取出，用紙吸去黏附在板底部的任何過剩的液體。
8. 將PCR 96板放在真空叉管內(nèi)，插入收集板，并且調(diào)節(jié)其高度使得PCR 96板滴下的液體正好落在收集板的孔內(nèi)。
9. 每孔中央加入80ul洗脫緩沖液（＃3）。靜止2分鐘。抽真空以收集干凈的PCR產(chǎn)物。如果需要增加產(chǎn)物的濃度，可以將洗脫緩沖液體積減至50ul。
利用離心法處理PCR反應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物
清洗緩沖液的濃溶液 （Buffer ＃2） 使用之前用乙醇稀釋。 如果是使用PCR 96單板試劑盒 （Cat# PC-500），在清洗緩沖液的濃溶液試劑瓶中加入48ml乙醇。 如果是使用PCR 96 384板試劑盒 （Cat# PC-501） ， 則取出12ml清洗緩沖液濃溶液于一空的試劑瓶中，并且加入48ml乙醇。處理每個(gè)板之前重復(fù)這一步驟。
操作流程：
1. 向PCR反應(yīng)物中加入1體積的結(jié)合緩沖液（＃1）并混合均勻。
2. 將PCR反應(yīng)物和結(jié)合緩沖液的混合物加至平板上。
3. 將一空的微平板（未提供）放在PCR 96板的下面以收集廢液。用吊桶式轉(zhuǎn)子750g離心2分鐘。如果處
理單個(gè)板時(shí)需要平衡。將廢液板上的廢液倒掉。
4. 吸取200ul稀釋的清洗緩沖液于每孔清洗板。將廢液板放在PCR 96板的下方，750g離心2分鐘，將廢液
倒掉。
5. 再重復(fù)兩次清洗的步驟，總共清洗三次。
6. 750g離心使板空干10分鐘。
7. 吸去黏附在板底部的任何過剩的液體。
8. 將收集板放在PCR 96板的下方，每孔中央加入80ul洗脫緩沖液（＃3）。靜止2分鐘。750g離心3分鐘
收集干凈的PCR產(chǎn)物。如果需要增加產(chǎn)物的濃度，可以將洗脫緩沖液體積減至50ul。
未提供的必需材料：
95％的乙醇或者無水乙醇
真空設(shè)備或者離心機(jī)
離心法時(shí)所需的收集廢液的板
故障排除：
流程中的清洗步驟操作有誤可能會導(dǎo)致片斷的回收效率低。
1 檢查清洗緩沖液（＃2）中是否加入乙醇。
2 清洗過程中要注意去除板底部多余的清洗緩沖液的液滴。
3 在加入洗脫緩沖液之前一定要使板完全空干。
各組分的儲存條件：
組分 儲存條件
PCR 96 板 室溫保存，保質(zhì)期 不限
結(jié)合緩沖液（Buffer #1） 22℃以上避光保存，保質(zhì)期見標(biāo)簽說明
清洗緩沖液（Buffer #2） 室溫保存，保質(zhì)期見標(biāo)簽說明
洗脫緩沖液（Buffer #3） 室溫保存，保質(zhì)期見標(biāo)簽說明
收集板 室溫保存，保質(zhì)期不限
訂貨信息：
目錄編號 產(chǎn)品說明
PC-500 PSI Ψ Clone PCR 96 單板試劑盒（板和試劑可用96次）
PC-501 PSI Ψ Clone PCR 96 4板試劑盒（板和試劑可用4×96次）
PC-502 PSI Ψ Clone PCR 96 4板試劑盒（板和試劑可用50×96次）
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| 加入時(shí)間：2017-01-11
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